Recuento aerobios mesófilos por filtración

Práctica 10

Recuento aerobios mesófilos por filtración 

Objetivos

Recontar los aerobios mésofilos presentes en el cultivo PCA y hacer una siembre mediante filtración por kitasato 

Fundamentos 

La productividad de este medio, está basada en el alto contenido nutricional de sus componentes, que permite el desarrollo de las bacterias presentes en la muestra. Cuando se analiza leche y productos lácteos algunos autores recomiendan suplementarla con leche descremada estéril de uso bacteriológico en una proporción de 1 g por litro.

Composición:

Fórmula (en gramos por litro)		Instrucciones
Extracto de levadura	2.5	Suspender 23,5 g en un litro de agua destilada. Calentar a ebullición con agitación constante. Distribuir. Esterilizar durante 15 minutos a 121°C.
Tripteína	5.0
Glucosa	1.0
Agar	15.0
pH final: 7.0 ± 0.2

Materiales y reactivos 

Materiales 

Mechero

Vasos de precipitado (agua destilada estéril, agua muestra, alcohol)

Embudo

Probeta 100 ml

Pipeta Pasteur

Matraz Kitasato

Alcohol

Agua Destilada Estéril

Placa Petri estéril

Pinzas

Mechero Bunsen

Filtro reticulado

Procedimientos 

Primero preparamos los materiales necesarios y limpiamos la mesa con lejía y abundante agua destilada.

A continuación montamos el kitasato, llenamos un vaso de precipitado con alcohol y preparamos el medio, los filtros y encendemos el mechero.

Después cogemos un filtro, abrimos su envoltorio poco a poco y lo cogemos con unas pinzas, siempre y cuando estén flameadas con alcohol, lo colocamos en una placa de petri donde habrá agua esterilizada previamente para que se despegue la cuadrícula de la otra parte, cuando esto ocurra, cogemos la cuadrícula y la ponemos en la parte de abajo del kitasato. Colocamos la parte de arriba del kitasato y echamos el agua de muestra con el agua estéril ya mezclada en una proporción 1:1 para facilitar la filtración. 

A continuación pulsamos el botón del aparato que hace vacío para que empiece a absorber el agua e impregnar la cuadrícula. Cuando la filtración haya terminado, con las pinzas flameadas, cogemos la cuadrícula impregnada en bacterias y la pasamos al medio correspondiente, en este caso PCA, intentado que no queden burbujas. 

Por último lo llevamos a la estufa a 37º

Resultados 

Microorganismos	Crecimiento
Staphylococcus aureus ATCC 25923	Bueno
Bacillus cereus ATCC 10876	Bueno
Escherichia coli ATCC 25922	Bueno
Lactobacillus fermentum ATCC 9338	Regular
Streptococcus agalactiae ATCC 13813	Bueno